PCR儀溫度校準(zhǔn)目前的使用情況

　　PCR又名聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，屬于一種分子生物學(xué)技術(shù)，主要用來(lái)在短期內(nèi)放大特定的DNA片段。而PCR儀重要的功能就是自動(dòng)的完成聚合霉反應(yīng)，并為DNA片段的放大提供一定的溫度條件。當(dāng)儀器在運(yùn)行的過(guò)程中，主要分為三個(gè)特征溫度循環(huán)，一種是高溫變性，具體方法是將DNA樣本加熱到90~95℃，讓其模板轉(zhuǎn)變?yōu)閱捂溄Y(jié)構(gòu)；另一種是低溫退火，是將DNA樣本的溫度降到50~65℃，使之能夠與引物相結(jié)合；第三種則是適溫延伸，就是采用再次升溫至70~75℃的方法來(lái)完成新鏈的復(fù)制。由此可見(jiàn)，PCR儀溫度的準(zhǔn)確性與實(shí)驗(yàn)的操作息息相關(guān)。

　　PCR儀溫度校準(zhǔn)目前的使用情況：

　　目前PCR儀在醫(yī)學(xué)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)中的使用平率較高，如用于親子鑒定以及個(gè)體識(shí)別等，這樣就導(dǎo)致了在使用的過(guò)程中各項(xiàng)指標(biāo)有可能發(fā)生偏差，而且將后期的校準(zhǔn)工作交給出廠商或者是由儀器自己進(jìn)行校準(zhǔn)，這樣就不能保證在檢測(cè)的過(guò)程中所有數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。由于PCR儀具有升降溫速度快的特點(diǎn)，因此所選用的溫度傳感器的熱慣性要小才能達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)。因此溫度傳感器的準(zhǔn)確性對(duì)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也有重要的影響，一般進(jìn)行校準(zhǔn)的方法為：溫度點(diǎn)在30度時(shí)，持續(xù)1分鐘：溫度點(diǎn)在95度時(shí)，持續(xù)3分鐘；溫度點(diǎn)在30度時(shí)，持續(xù)2分鐘；溫度點(diǎn)在90度時(shí)，持續(xù)3分鐘；溫度點(diǎn)在50度時(shí)，持續(xù)3分鐘；溫度點(diǎn)在70度時(shí)，持續(xù)3分鐘；溫度點(diǎn)在60度時(shí)，持續(xù)3分鐘；溫度點(diǎn)在30度時(shí)，持續(xù)1分鐘，再借助系統(tǒng)軟件將檢測(cè)的數(shù)據(jù)進(jìn)行系統(tǒng)分析。

　　PCR儀溫度校準(zhǔn)技術(shù)是一項(xiàng)分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)，在目前的臨床檢測(cè)以及司法檢測(cè)中被大力的推廣應(yīng)用，在進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)很多原因造成結(jié)果的不準(zhǔn)確性，因此對(duì)其進(jìn)行定期的校準(zhǔn)時(shí)絕對(duì)有必要的。