關(guān)于PCR儀您了解多少？

　　PCR儀已成為一種潮流。反應(yīng)時(shí)間從90分鐘縮短到30分鐘，是受歡迎的，畢竟誰也不想在預(yù)約時(shí)排隊(duì)等太久。溫度循環(huán)是所有PCR的基礎(chǔ)。變溫速率將決定PCR運(yùn)行的整體速度。毫無疑問，變溫越快，PCR運(yùn)行也越快。宣傳資料往往也會(huì)首先展示zui高變溫速率以暗示運(yùn)行速度更快。因此，在拿到參數(shù)表時(shí)，我們先會(huì)留意變溫速率，也就是升降溫速率。當(dāng)然，樣品的變溫速率可沒有模塊那么高。這就好比在爐子上燒水，爐子很快就達(dá)到100℃以上，但水可能只有50℃。模塊的熱量傳遞到樣品還需要一定的滯后時(shí)間。因此，只根據(jù)模塊溫度編程而不考慮樣品體積的變溫速率并不能算準(zhǔn)確。這個(gè)參數(shù)能反應(yīng)儀器根據(jù)體積來控制樣品達(dá)到設(shè)置溫度、遵循預(yù)設(shè)的實(shí)驗(yàn)方案運(yùn)行的真實(shí)能力，更有效地評(píng)估真實(shí)性能。

　　PCR儀通常由熱蓋部件、熱循環(huán)部件、傳動(dòng)部件、控制部件和電源部件等部分組成。在普通PCR儀設(shè)計(jì)基礎(chǔ)上增加熒光信號(hào)激發(fā)和采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)，形成了具有熒光定量PCR功能的儀器。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR擴(kuò)增原理相同，在PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記，使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過熒光信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號(hào)連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)，得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果輸出。

　　有單通道，雙通道和多通道之分。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時(shí)候，選用單通道；有多種熒光標(biāo)記的時(shí)候使用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標(biāo)記和目的基因表達(dá)產(chǎn)物，因?yàn)橐淮沃荒軝z測一種目的基因的擴(kuò)增量，需多次擴(kuò)增才能檢測完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR，實(shí)現(xiàn)一次檢測多種目的基因的功能。